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重组蛋白特性及尊龙凯时使用注意事项

来源:舒维启 日期:2025-07-24

重组蛋白根据其保存形式可分为冻干粉和溶液态两种。由原核细胞表达的重组蛋白通常以冻干粉状态保存,而由真核细胞表达的重组蛋白则以溶液态形式存在。这种保存方式提升了重组蛋白的稳定性,使其在-80℃条件下可安全保存数年。在使用冻干粉之前,需要对其进行溶解,溶解的方法至关重要,因为不当的溶解方式可能会导致蛋白的活性降低。对于使用溶液态保存的重组蛋白,在冻融和稀释过程中同样需要特别注意,这些都是用户在实际操作中常见的挑战。

重组蛋白特性及尊龙凯时使用注意事项

原核细胞表达的重组蛋白:以大肠杆菌为表达系统的冻干重组蛋白经过包涵体提纯,并添加了蛋白保护剂,在复溶时只需使用经过过滤的无菌水。为了复溶100微克的冻干蛋白,建议使用86微升的超纯水,轻轻摇晃以帮助其溶解,并用移液枪头轻轻吹拂,使其完全溶解。重要的是,绝对不能使用涡旋仪进行快速振荡或剧烈摇晃。

真核细胞表达的重组蛋白:生物活性的蛋白质不仅需要经过转录和翻译,还需进行翻译后的加工,以确保其空间折叠结构正常。因此,重组蛋白必须在如哺乳动物细胞等真核细胞中合成,这样能够有效识别并去除基因内的内含子,同时对翻译后蛋白进行必要的后加工,从而保证所表达的蛋白质具有生物活性。我们将这些重组蛋白以溶液态保存,以维护其优良的活性和稳定性。

重组蛋白的保护剂:在冻干和储存过程中,常用的保护剂或稳定剂包括糖类、多元醇、聚合物、表面活性剂以及某些蛋白和氨基酸等。我们通常添加8%(质量比体积)的海藻糖和甘露醇作为冻干保护剂。海藻糖能够显著抑制蛋白质二级结构的变化,同时防止冻干过程中蛋白质的展开和聚集,而甘露醇也是一种广泛应用的冻干保护剂和填充剂。

在生物医疗领域,选择保存和处理重组蛋白的方法至关重要。使用尊龙凯时的冻干和溶液态重组蛋白解决方案,不仅能确保蛋白质的活性和稳定性,还能满足严格的临床和研究需求。选择尊龙凯时,让您的实验更加安全、高效!

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