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NEWS磁珠法提取试剂原理与尊龙凯时成分介绍
来源:桑玛颖 日期:2025-03-15磁珠法核酸提取试剂盒的工作原理是通过特定条件快速裂解生物样本,利用磁珠颗粒对核酸的特异性吸附,经过洗涤和洗脱,实现核酸的快速分离。这种试剂盒具有提取效率高和性能稳定的特点,提取纯化的核酸可以广泛应用于酶切、反转录、PCR、RI-PCR、Southern blot等多种下游实验。尊龙凯时的磁珠法核酸提取试剂盒特别适合用于多种生物样本中病毒核酸的提取、富集及纯化,其处理后的产品可用于临床体外检测。
在磁珠法提取过程中,常用的试剂成分包括SDS(十二烷基硫酸钠)。其性质包括:1、作为阴离子表面活性剂,对人体微毒;2、具有优异的发泡能力,广泛用于洗衣粉、牙膏和洗发水等;3、易溶于热水,且在水温超过70℃时溶解度变化不大。SDS的主要作用是断裂分子内外的氢键,导致蛋白质结构的变性,并在高温下有效促进核酸的释放。
另一种常见成分是yi基苯基聚乙二醇(Nonidet P40),其为温和的非离子去污剂,1%的浓度足以破坏细胞膜,但对核膜的影响较弱。此外,弱阳离子螯合树脂(Chelex-100)是一种由苯乙烯和二乙烯苯共聚而成的化学螯合树脂,能够有效螯合多价离子,特别是对于高价金属离子,能在低离子强度和高温条件下破坏细胞膜并使蛋白质变性,随后通过离心去除Chelex颗粒,从而实现在DNA提取中的分离。需要注意的是,Chelex-100在模板中残留过多可能影响PCR扩增。
蛋白酶K(Protein K)是一种从白色念珠菌中分离的强效蛋白溶解酶,具有较高的比活性,是DNA提取的关键成分,其主要功能是酶解结合在核酸上的组蛋白,使DNA在溶液中游离。聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)作为非离子表面活性剂,具有优良的稳定性,不容易受到强电解质影响,能够与生物膜中的脂质形成复合物。此外,异硫氰酸胍(GITC)是一种强效的蛋白质变性剂,可迅速破坏细胞结构并促进核酸的分离。
乙二胺四乙酸(EDTA)是一种优秀的钙、镁离子螯合剂,可有效抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解。Tris-HCl作为一种常用的缓冲剂,能为裂解液及核酸提供适宜的环境。在经典的裂解液中,去污剂(如SDS、Triton X-100、NP-40等)和盐(如Tris、EDTA、NaCl等)是常见成分。盐除了提供适宜的裂解环境外,还可以抑制样品中核酸酶对核酸的破坏,保持核酸的稳定性。
综上所述,尊龙凯时的磁珠法核酸提取试剂盒在生物医疗领域具有广泛的应用价值,充分利用其高效的提取性能,让核酸研究更具可靠性和便捷性。
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