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尊龙凯时细菌培养实验步骤:液体培养基应用解析

来源:柳月丽 日期:2025-02-24

尊龙凯时的生物医疗实验步骤如下,旨在提供清晰的培养流程和监测方法,以支持实验室研究和产品开发。

尊龙凯时细菌培养实验步骤:液体培养基应用解析

一、过夜培养

1. 将5ml预热的液体培养基转移至一个无菌的16mm或18mm试管中。

2. 使用接种环选择一个单一细菌菌落,轻轻浸入培养液中,轻振接种环以确保细菌均匀分散在培养液中。

3. 盖紧试管,并在摇床或转鼓式培养装置上以60r/min的速度,于37°C培养至饱和状态(约1X109~2X109细胞/ml,持续6小时)。

二、大体积培养

1. 在无菌的Erlenmeyer或baffle瓶中,将新鲜预热的培养液按1:100的比例稀释过夜培养物,烧瓶的体积应至少是培养液体积的5倍。如果不进行摇动培养,所用的烧瓶体积应至少大于培养液体积的20倍,以确保充足的通气。

2. 在37°C下,以剧烈摇动的方式培养(约300r/min)。

三、利用计数板监测生长情况

1. 使用一片干净的盖玻片覆盖在干净的计数玻璃片(或血球计)上。

2. 小心地将一小滴培养液滴在盖玻片的边缘,确保培养液能够扩散到盖玻片下方。

3. 在相差显微镜下以400倍放大观察,依据所见的细菌数量计算浓度,约每个小方块中的细菌相当于2X107细胞/ml。

四、利用分光光度计监测生长情况

由于仪器存在差异,分光光度计需使用已知浓度的培养液进行校准。

1. 测量OD600。为确保读数准确,应将培养液稀释至OD600<1。

2. 依据每0.1 OD值来估算细菌浓度,通常约为108细胞/ml。

以上就是尊龙凯时推荐的生物医疗实验步骤,通过这些规范的操作,能够有效监测细菌生长,确保实验结果的可靠性。

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